2026年3月13日，EMA网站对亚硝胺杂质的限度进行了更新。新增了13种亚硝胺杂质的限度，同时对8个亚硝胺杂质进行了调整。我们对最近更新内容进行了分析和解读。

 药物降解产物相关亚硝胺杂质是在亚硝胺杂质更新中占比很大。其中一类是叔胺脱烷基形成的亚硝胺。包括N-亚硝基-去甲基-多塞平，N-亚硝基-去甲基-地尔硫卓，N-亚硝基-去甲基-乌利司他，N-亚硝基-去丁基-决奈达隆。

还包括其他降解杂质形成的亚硝胺杂质。如N-亚硝基-地西泮杂质D，其中地西泮杂质D既是地西泮合成的中间体，也是地西泮的降解杂质。

N-亚硝基-去环丙羰基-奥拉帕利。该杂质为奥拉帕利水解脱去环丙羰基形成仲胺的相关亚硝胺杂质。

还有N-亚硝基-达比加群酯酰胺杂质。达比加群酯曾在2023年3月由于亚硝胺杂质问题(N-亚硝基-达比加群酯)在美国市场被召回。我们也介绍过N-亚硝基-达比加群酯的合成和检测。最近更新的亚硝胺杂质为达比加群酯水解形成酰胺的相关亚硝胺杂质。

第一次增加了结构中含有两个亚硝胺基团的亚硝胺杂质N,N’-二甲基亚乙基二亚硝胺。

对多个亚硝胺杂质的限度进行了调整。EMA对于亚硝胺杂质限度的考量主要基于以下几个方面：构效关系，即亚硝胺杂质致癌效力分类方法(CPCA)；细菌回复突变试验，即增强Ames实验；体内致突变性研究；基于结构类似化合物已知的亚硝胺毒理学数据。

调整限度的大多数化合物，是根据细菌回复突变试验或体内致突变性研究等毒性学实验数据，对原限度进行了放宽。但对于N-亚硝基葡甲胺，原限度基于细菌回复突变试验阴性，为1500 ng/day。现基于体内致突变性研究中测试为阳性，对其限度进行了收紧，调整为100 ng/day。EMA对于亚硝胺杂质限度调整也体现了较明确的数据优先级：体内致突变性研究数据＞细菌回复突变试验数据＞CPCA推导数据。